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在醫(yī)學(xué)臨床、生物學(xué)研究上,用于測定各種各樣的抗原、半抗原和抗體,Elisa法為雜交瘤細胞株的篩選提供了簡便、靈敏、快速的測定方法。那讓我們一起來看看抗體抗原測定的Elisa方法吧!抗體抗原測定的Elisa方法一:直接法1、將抗原吸附在固相載體表面;2、添加一種封閉試劑,防止檢測抗體出現(xiàn)非特異性結(jié)合;3、添加直接偶聯(lián)某種酶(如HRP)的檢測抗體。該檢測抗體將結(jié)合抗原,并且剩余的抗體會從孔中洗掉;4、添加這種酶的底物;5、短暫孵育后,在酶標儀上測定每個孔的信號??贵w抗原測定的El...
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Elisa是一種快速、靈敏、準確可靠的定性定量分析方法。樣本的處理對于Elisa實驗的成功起著關(guān)鍵的作用。組織樣本一般制成組織勻漿,處理方法如下:(1)使用干凈的工具解剖目標組織,盡快置于冰上,以防被蛋白酶降解。(暫時不處理的組織,置于圓底微量離心管中,浸入液氮中“速凍”,在-80℃下存儲樣品備用)。(2)用預(yù)冷的PBS緩沖液(0.01M,pH=7.4)洗滌組織去除殘留的血液,稱重后備用。若組織塊較大,需先剪碎。(3)在冰上用研磨緩沖液(常用PBS緩沖液,但最好使用50mMT...
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細胞培養(yǎng)到底選用培養(yǎng)瓶?培養(yǎng)皿?還是培養(yǎng)板?這個問題的答案是:根據(jù)實驗?zāi)康暮托枰獊磉M行選擇!來讓我們一起看看培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板的選擇吧!一、培養(yǎng)瓶如果實驗?zāi)康氖桥囵B(yǎng)原代細胞和常規(guī)的傳代細胞,一般選擇用培養(yǎng)瓶,可獲得大量實驗用細胞。培養(yǎng)瓶是通過表面積來命名的,例如T25、T75、T175,數(shù)字就是表面積,T25就是25cm2,T75就是75cm2,T1755就是175cm2。常見的細胞培養(yǎng)瓶分為一次性的塑料瓶和玻璃瓶,他們各有特色。玻璃瓶的優(yōu)點是:成本低、透光性強、可重復(fù)使...
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原代細胞保留了體內(nèi)組織的特性和功能,因此,原代細胞常被用于細胞實驗等,讓我們一起來看看原代細胞培養(yǎng)的應(yīng)用和優(yōu)缺點。一、原代細胞培養(yǎng)的應(yīng)用(1)藥理學(xué)和藥效學(xué)研究原代細胞培養(yǎng)可用于評估藥物對特定細胞類型的作用和效果,更接近體內(nèi)情況,有助于篩選和優(yōu)化藥物。(2)癌癥研究原代腫瘤細胞培養(yǎng)可以提供更準確的癌癥模型,用于研究腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移和治療反應(yīng)。(3)組織工程研究原代細胞可用于構(gòu)建組織工程支架或模擬器官的種子細胞,用于再生醫(yī)學(xué)和器官修復(fù)研究。二、原代細胞的優(yōu)點(1)保留了原代細胞...
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培養(yǎng)基的目的是給細胞提供營養(yǎng),促進細胞增殖。細胞培養(yǎng)基內(nèi)含平衡鹽溶液,還含有少量的碳水化合物、氨基酸、脂類、無機鹽、維生素、微量無素和細胞生長因子等。根據(jù)其成分、用途和性質(zhì),常見培養(yǎng)基的分類如下:常見培養(yǎng)基的分類一:合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基的成分明確,營養(yǎng)全面,適用于各種細胞類型的培養(yǎng)。常見的合成培養(yǎng)基有MEM、DMEM、RPMI1640等。常見培養(yǎng)基的分類二:天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基以動物血清或血漿為基質(zhì),添加一定量的營養(yǎng)成分,適用于某些特定細胞類型的培養(yǎng)。如添加了動物血清的DME...
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